分光光度計(jì)(spectrophotometer)是一種測量物質(zhì)的吸收或透射比例隨波長變化的儀器。該設(shè)備通過對樣品中不同波長光的吸收或透射比例,可以得到物質(zhì)在不同波長下的吸收譜或透射譜,從而獲得許多有關(guān)樣品的信息。
1.分光光度計(jì)原理
分光光度計(jì)基于比爾伯‐朗定律,即溶液中的吸收與物質(zhì)濃度成正比,與光程長度成正比,與吸收介質(zhì)的本質(zhì)和所用波長有關(guān)。當(dāng)電磁輻射穿過介質(zhì)時(shí)的吸收或透射程度,跟介質(zhì)本身的特性、路徑長度和波長有關(guān)。學(xué)術(shù)上,其中一個(gè)常見的使用方式是:測基準(zhǔn)樣品吸收率,并將其作為未知樣品測量結(jié)果標(biāo)定的參照系數(shù),此方法叫做外標(biāo)法。
2.分光光度計(jì)的組成
分光光度計(jì)的主要部件包括:入射光源(通常是Xenon閃光燈)、單色器(調(diào)節(jié)波長)、光路系統(tǒng)(如樣品池), 檢測器(如移液器), 以及數(shù)據(jù)分析軟件。其中最重要的是單色器,在很大程度上決定了其波長選擇能力和分辨率。
3.分光光度計(jì)的用途
分光光度計(jì)廣泛應(yīng)用于生化、藥學(xué)、物理、環(huán)境及材料等科學(xué)領(lǐng)域。它可以用于測量許多種分子,如蛋白質(zhì)、核酸堿基、有機(jī)分子、無機(jī)離子、金屬離子等。分光光度計(jì)可用于測定樣品濃度、反應(yīng)動力學(xué)特性、反應(yīng)熱力學(xué)性質(zhì)、溶解度等。