在化學分析實驗中,高效液相色譜儀(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)作為一種分離技術(shù),已成為分析領(lǐng)域不可或缺的工具。以下將從操作流程和注意事項兩方面介紹高效液相色譜儀。
1.高效液相色譜儀操作流程
高效液相色譜儀操作流程主要包括進樣、洗脫分離、檢測和數(shù)據(jù)處理四個步驟。
進樣:將待分離物質(zhì)溶液注入進樣器中,經(jīng)過一定的前處理后進入到柱中。
洗脫分離:在填充有固定相的柱子中加入流動相,在極小分子間離散的情況下靠懸浮物排斥作用進行分離。
檢測:使用 UV-Vis 或熒光等技術(shù)來檢測并記錄分離后物質(zhì)在柱子中的峰形圖譜,并對其進行數(shù)據(jù)處理。
數(shù)據(jù)處理:對柱子中分離物質(zhì)的組成比例進行計量。
2.高效液相色譜儀注意事項
在使用高效液相色譜儀時,需要注意以下幾點:
1. 確保儀器的使用環(huán)境干凈整潔。以避免臟污與異物影響儀器穩(wěn)定性以及檢測結(jié)果的準確性。
2. 在進行某類樣品分析前,需要進行校正試驗,保證后續(xù)實驗結(jié)果的準確性和可信性。
3. 嚴格遵守處理流程和操作規(guī)范,做好實驗記錄、報告等工作,方便后續(xù)驗證和重現(xiàn)實驗過程。
4. 對于儀器的使用和維護,需要由專業(yè)人員進行,按照廠家提供的要求檢查和保養(yǎng)儀器設(shè)備。